产品货号:
BTN60306
中文名称:
柱式血液DNA提取试剂盒
英文名称:
Blood DNA column extraction kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品是基于硅胶膜离心吸附柱原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂盒。
保存:室温,有效期1年。
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- 提取的基因组DNA纯净,OD260/280在1.8~2.0之间,无蛋白质和RNA污染。
- 可直接用于后续的PCR、酶切、杂交等实验。
- 产量高,一般为1~10μg/mL全血(对哺乳动物血液)。
- 操作简单,整个过程约20分钟,全室温操作,适合大规模样品处理。
- 用量广泛,每次可以处理少达20μL(对禽类动物血液)或多达1mL的血液(对哺乳动物血液)。
- 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
组分 | 规格 |
红细胞裂解液 | 25mL |
血液DNA纯化溶液A | 25mL |
离心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脱液 | 10mL |
保存:室温,有效期1年。
- 将0.5mL红细胞裂解液加入到0.02~1mL新鲜或抗凝血液中,如果是冷冻血液,需要先37℃水浴融化再加入红细胞裂解液,吹打混匀。
- 红细胞裂解液非常容易长菌,取用需要在无菌条件下进行。
- 哺乳动物:血液使用量以300μL以下为宜,使用量越大产量越高,但产率会降低。如果血液多于300μL,重复1~2步两次可以提高产率。
- 禽类:血液使用量以20μL以下为宜,可以从第3步做起。
- 室温12000~15000rpm离心5分钟,沉淀呈粉红色,小心倾去上清。
- 再短暂离心30秒,吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解,但一般可以省略。
- 向有沉淀的离心管内加入0.5mL血液DNA纯化溶液A,用移液枪吹打使沉淀充分悬浮起来。
- 血液DNA纯化溶液A有少量晶体沉淀,用前需要摇晃均匀。
- 此步目的是裂解细胞,释放DNA,所以吹打越充分越好。
- 血液DNA纯化溶液A有少量晶体沉淀,用前需要摇晃均匀。
- 静置2分钟待溶液变清亮后,将液体转移到离心吸附柱中并静置2~5分钟,以使DNA与硅胶膜充分结合。
- 12000rpm离心30秒,DNA将吸附到膜上,弃收集管中的废液。
- 加入0.7mL的通用洗柱液,12000rpm离心30秒,弃收集管中的废液。
- 加入0.3mL的通用洗柱液,12000rpm离心30秒,弃收集管中的废液。
- 12000rpm离心30秒,甩干残留液体。此步很重要,以去除膜上残留通用洗柱液,否则会影响后续反应。
- 将离心吸附柱置于一新的1.5mL塑料离心管(自备)中,加入适量50μL DNA洗脱液,室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液在65℃预热后再使用,洗脱DNA的效果会更好。
- 12000rpm离心30秒,离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或放冰箱长期保存。
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